细胞检测(细胞周期检测方法及原理)

35小吃技术网 推荐阅读 2022年12月16日10时06分04秒 270 0

细胞检测(细胞周期检测方法和原理)

细胞周期

细胞周期是指细胞从一次分裂完成到下一次分裂结束的全过程,分为间期和有丝分裂两个阶段。

间期分为三个阶段:早期DNA合成(G1期)、DNA合成(S期)和晚期DNA合成(G2期)。有丝分裂,即细胞分裂阶段,分为前期、中期、后期和后期。

细胞周期的调节主要通过G1期的滞留来实现,G0期意味着细胞处于滞留状态。细胞通过M期分成两部分,一部分可以继续分裂循环,一部分转入G0期。G0期是脱离细胞周期,暂时停止分裂的时期。但在一定的刺激下,可以进入细胞周期,合成DNA,分裂。

G0期的特点是:①未受刺激的G0细胞仍存在DNA合成和细胞分裂的潜力;②G0细胞受刺激增殖时,可合成DNA,并进行细胞分裂。细胞周期的调节主要通过G1期的滞留来实现,G0期意味着细胞处于滞留状态。细胞通过M期分成两部分,一部分可以继续分裂循环,一部分转入G0期。G0期是脱离细胞周期,暂时停止分裂的时期。但在一定的刺激下,可以进入细胞周期,合成DNA,分裂。

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专有技术

PI染色-流式细胞术检测细胞周期的原理:

碘化丙锭,PI)是一种荧光染料,可嵌入双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合,无碱基特异性。PI与双链DNA结合后能产生荧光,荧光强度与双链DNA含量成正比。细胞内的DNA经PI染色后,可以用流式细胞仪测定细胞的DNA含量,然后根据DNA含量的分布分析细胞周期。

由于细胞周期不同时期的DNA含量不同,正常细胞通常在G1/ G0期有二倍体DNA含量(2N),在G2/ M期有四倍体DNA含量(4N),S期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。PI能与DNA结合,其荧光强度直接反映细胞内DNA的含量。因此,当用流式细胞术结合PI染色法检测细胞内DNA含量时,可以将细胞周期的各期分为G1/G0期、S期和G2/M期,并通过专用软件计算得到的流式直方图对应的各期细胞百分比。

结果示例

参考文献:a . b .,c .谢,柯伟等“Yes相关蛋白调节阿霉素肾病足细胞周期重入和去分化”细胞死亡与疾病第10卷,12卷,915页。2019年12月4日,doi:10.1038/s41419-019-2139-3

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